发布时间:2020-02-17所属分类:医学论文浏览:1次
摘 要: 摘 要:目的:探讨分析应用酶联免疫法与胶体金法检测乙肝表面抗原的优缺点。方法:选取来自湖北某单采血浆站的 76 份抗 -HBV 阳性血清作为研究对象,分别采用酶联免疫法和胶体金法对这些标本进行乙肝表面抗原检测并分析。结果:经胶体金法检测结果及酶联免疫
摘 要:目的:探讨分析应用酶联免疫法与胶体金法检测乙肝表面抗原的优缺点。方法:选取来自湖北某单采血浆站的 76 份抗 -HBV 阳性血清作为研究对象,分别采用酶联免疫法和胶体金法对这些标本进行乙肝表面抗原检测并分析。结果:经胶体金法检测结果及酶联免疫法检测结果同时为阳性的标本有 26 份。胶体金法检测结果为阳性,而酶联免疫法检测结果为阴性的标本有 2 份;胶体金法检测结果为阴性,而酶联免疫法检测结果为阳性的标本有 3 份;胶体金法检测结果及酶联免疫法检测结果同时为阴性的标本有 45 份。经统计学分析,应用胶体金法进行乙肝表面抗原检测的假阴性率为 3.95%,假阳性率为 2.63%。应用酶联免疫法进行乙肝表面抗原检测的敏感性明显高于应用胶体金法进行乙肝表面抗原检测的敏感性,差异显著(P < 0.05)。结论:酶联免疫法与胶体金法均是检测乙肝表面抗原的比较可靠的方法。胶体金检测法适合于大规模的乙肝病毒快速筛检,酶联免疫检测法则适合于对少数胶体金法检测结果呈阳性的患者进行再次筛检,进而大幅度提升检测的准确率。
关键词:酶联免疫法;胶体金法;乙肝表面抗原检测
在我国,HBV( 乙型肝炎病毒 ) 的高度流行地区,乙型肝炎病毒的感染率为 60% ~ 70%。全国约有 9 300 万人携带乙型肝炎病毒,其中约 3 000 万人是乙型肝炎患者,60% 的肝炎患者是慢性肝炎患者 [1]。 HBV 与肝硬化和原发性肝癌密切相关。HBV 的预防和治疗是我国传染病控制的首要问题,尚无明确有效的治疗方法。此外,随着人们生活水平的提高和健康意识的增强,检测出两对半的乙型肝炎已成为人们日常体检,献血者体检,医院急诊患者和外科手术的常规检查项目。目前实验室普遍采用的酶联免疫法检测,虽然其性能得到公认,但需要相应设备,检测时间长,操作较繁琐,不便单样本快速检测。但胶体金快速检测板不需要相应设备也能够快速检测单个样本,非常便捷,适于快速初步检测 [2]。
HBV 属于嗜肝病毒科的 DNA 病毒,其大小形状是直径为 42nm 的球形颗粒。乙型肝炎病毒具有非常高的感染能力 [4-5]。在我国境内,乙型肝炎病毒的感染率已接近 5 成,主要的感染途径包括母婴传播、血液感染、医源性感染、性行为以及日常生活中的体液等等途径都是极易造成感染的。传染性病原体不仅对人体功能造成严重危害,HBV 还会引起严重的肝病,如 HBV 感染引起的肝硬化和肝癌。因此,必须高度重视乙型肝炎的防治。为提高乙型肝炎防治工作的针对性和有效性,必须进行准确有效的乙型肝炎病毒检测。一旦乙型肝炎病毒进入人体,经过一系列的变化,乙型肝炎病毒基因(HBV-DNA)通过肝细胞的细胞质进入细胞核。此时,乙型肝炎病毒基因的双链结构的一部分变为闭环结构,并且基于该模板转录,成为 mRNA,最后翻译成乙型肝炎表面抗原。HBsAg 主要反映乙型肝炎病毒的活性和患者的乙型肝炎状况。日前,最常用的乙型肝炎表面抗原检测方法包括有:酶联免疫法、胶体金法等 [6]。
酶联免疫法(ELISA),也称为固相酶联免疫吸附测定法,使用化学反应将测试对象与酶连接,然后使用免疫反应将抗原结合在测试对象和固相载体,最后添加基板进行显色。通过颜色的深度判断抗体的水平,酶联免疫法(ELISA)广泛用于乙型肝炎病毒的检测。它主要起定性检测作用,具有以下优点:灵敏度高、特异性强、检测成本低、无污染。但是,这种检测方法也存在一定的缺陷:实验操作步骤复杂、操作时间长;根据相关的实验证明,酶联免疫法在乙型肝炎抗体的检测中存在一定的缺陷,即发生假阳性检测结果 [7]。
1 资料与方法
1.1 样本来源
选取来自湖北某单采血浆站的 76 份抗 -HBV 阳性血清,年龄在 18 ~ 49 岁,其平均年龄在(28.3±15.6)岁,男性样本 43 份,女性样本 33 份。
1.2 检测方法
血样本为静脉血,每份 5 mL。及时分离血清,分别用酶联免疫法和胶体金法进行测定。酶联免疫法诊断试剂盒(由北京万泰生物药业有限公司提供)、胶体金法诊断试剂盒(由英科新创厦门科技有限公司提供)[3]。严格按照试剂说明书操作。
1.3 统计学处理
数据采用 SPSS 22.0 统计软件进行分析处理。符合正态分布的测量数据表示为平均值 ± 标准偏差(X — ±s);计数数据用示例(百分比)表示,并使用 χ 2 测试。差异有统计学意义,P < 0.05。
2 结果与分析
酶联免疫法阳性 26 份,胶体金法阳性 26 份。2 种测试方法阳性均为 26 份,占比为 34.21%,均为阴性的有 45 份,占比为 59.21%,2 种测试方法的一致率非常高,其占比为 93.42%。酶联免疫法的假阴性有 3 份,占比为 3.95%,假阳性有 2 份,其占比为 2.63%,与胶体金法测试的不符合率为 6.58%。详情如表 1 所示。
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3 讨论
综上所述,酶联免疫法与胶体金法均是检测乙肝表面抗原的比较可靠的方法。然而,胶体金检测法对检测设备的要求较低,对单个样体测试结果迅速,但是偶有假阳性结果出现,所以胶体金检测法适合于大规模的乙肝病毒快速筛检;酶联免疫检测法对检测设备要求高,测试结果准确,可以有效避免假阳性结果,所以,酶联免疫检测法则适合于对少数胶体金法检测结果呈阳性的患者进行再次筛检,进而大幅度提升检测的准确率。
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