不同产地马齿苋的质量分析

发布时间：2020-01-02所属分类：医学论文浏览：1次

摘 要： 摘 要：对不同产地的马齿苋的质量进行分析与评价。以贵州、四川、北京、西安四个产地的马齿苋药材为研究对象，对其水溶性浸出物、醇溶性浸出物进行检查。马齿苋中水溶性浸出物 19.7%~35.7%之间、醇溶性浸出物在 10.8%~17.0%之间;采用紫外分光光度法测定马齿

　　摘 要：对不同产地的马齿苋的质量进行分析与评价。以贵州、四川、北京、西安四个产地的马齿苋药材为研究对象，对其水溶性浸出物、醇溶性浸出物进行检查。马齿苋中水溶性浸出物 19.7%~35.7%之间、醇溶性浸出物在 10.8%~17.0%之间;采用紫外分光光度法测定马齿苋药材中多糖和总黄酮含量。多糖含量在 3.54%~9.98%之间，总黄酮含量在 0.77%~0.97%之间。不同产地马齿苋质量差异较大。

　　关 键 词：马齿苋;产地;多糖;总黄酮

　　马齿苋(Purslane)为马齿苋科(Portulacaceae)马齿苋属(Portulaca)的干燥地上部分，全草入药，具有清热解毒、凉血止血的功效。现代药理研究表明，马齿苋在抗菌、抗衰老、降血脂、降血糖等方面发挥着重要的药理活性作用，临床上常用预防高血压、冠心病、糖尿病等常见疾病[1]。马齿苋不仅可入药，还是人们喜爱的食材，为天然野生佳蔬。

　　马齿苋的化学组成复杂多样，主要有多糖、黄酮、生物碱、萜类、挥发油等化学成分[2]。其中，马齿苋的主要活性成分黄酮和多糖因含量高、作用广，受到众多科研工作者的关注，但研究内容主要集中在有效成分的提取、药理及药效等方面[3-7]。马齿苋跨地区的质量分析鲜有报道。

　　对于马齿苋的质量控制，2015 版《中国药典》仅对马齿苋药材的性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别、水分检查做了规定，未对其有效成分及其质量控制进行记载[8]。

　　为了更加科学客观的评价马齿苋药材的质量，在完成药典规定项目的基础上，本文对四川、贵州、北京、西安四产地的马齿苋药材进行浸出物检查，并以药理作用明确的活性成分多糖和黄酮成分作为指标成分，进行含量测定，对马齿苋药材进行质量分析，为马齿苋药材的进一步研究与开发和质量标准的修订提供一定的科学依据。

　　1 实验部分

　　1.1 仪器

　　Cary60 紫外-可见分光光度计(安捷伦科技有限公司)、GR-202 型分析天平(日本 AND 公司)、 MD 100-2 型上皿电子天平(上海天平仪器厂)、 MH-500 调温型电热套(北京科伟永兴仪器有限公司)、KQ5200DE 型超声提取仪(昆山市超声仪器有限公司)、SHZ-D 循环水式真空泵(巩义市予华仪器有限公司)、恒温水浴锅(河北省黄骅航天仪器厂)、恒温鼓风干燥箱(上海琅 实验设备有限公 玕司)。

　　1.2 材料

　　葡萄糖标准品(批号：110833-201205，中国食品 药 品 检 定 研 究 院 ) 芦 丁 标 准 品 ( 批 号 ： 10080-200707，中国药品生物制品检定所)、乙醇(天津市河东区红岩试剂厂，分析纯)、石油醚(天津市河东区红岩试剂厂，分析纯)、苯酚(分析纯，西安化学试剂厂)、浓硫酸(分析纯，西安化学试剂厂)、亚硝酸钠(天津市巴斯夫化工有限公司)、硝酸铝(西安化学试剂厂，分析纯)、氢氧化钠(开封东大化工有限公司试剂厂，分析纯)、实验用水为蒸馏水、马齿苋药材(批号：2013.08.20 产地：贵州 、四川、北京、西安)。

　　2 实验方法

　　2.1 鉴别[8]

　　取本品粉末 2 g，加水 2 mL，加甲酸调节 pH 值至 3~4，冷浸 3 h，滤过，滤液蒸干，残渣加水 5 mL 使溶解，作为供试液。另取马齿苋对照药材 2 g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验。

　　吸取上述两种溶液各 1~2 μL，分别点样于同一硅胶 G 薄层板上，以饱和正丁醇-冰醋酸-水(4:1:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以 0.2% 茚三酮乙醇溶液，在 110 ℃加热至斑点显色清晰。按照 2015 版四部薄层色谱法分析，在与马齿苋对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，二者具有相同的色谱行为，结果见图 1。

　　2.2 浸出物测定

　　按照《中国药典》2015 版四部浸出物测定法项下的热浸法(通则 2201)，对马齿苋进行药材水溶性和醇溶性浸出物的含量测定。

　　2.2.1 水溶性浸出物测定

　　取供试品约 1.0 g，精密称定，置 50 mL 具塞锥形瓶中，精密加水 25 mL，密封称重定量，静置 1 h后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸 1 h，放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液 10 mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于 105 ℃干燥 3 h ，置干燥器中冷却 30 min，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量(公式(1))，结果见表 1。

　　浸出物含量(%)=(W3-W1)×25/(10×W2)× 100%

　　2.2.2 醇溶性浸出物测定

　　以 75%乙醇(v/v)溶液代替蒸馏水为溶剂，照水溶性浸出物测定法测定，结果见表 1。以 75%乙醇(v/v)溶液代替蒸馏水为溶剂，照水溶性浸出物测定法测定，结果见表 1。

　　2.3 马齿苋多糖的含量测定[9]

　　2.3.1 葡萄糖标准溶液的制备

　　精密称取 105 ℃干燥至恒重的葡萄糖标准品适量，加蒸馏水溶解稀释，配制浓度为 83.7μg·mL-1 的标准溶液。

　　2.3.2 供试品溶液制备

　　称取马齿苋样品粉末(过 20 目筛)10 g，按料液比 1:12.5 加入石油醚，索氏提取约 5 h，挥干乙醚，得马齿苋脱脂样品。

　　精密称取马齿苋脱脂样品适量，置具塞锥形瓶中，按料液比 1:30 精密加入蒸馏水，浸泡 10 h，于 60 ℃超声提取 25 min，取适量续滤液 5 倍稀释后作为样品供试液。

　　2.3.3 样品含量测定

　　精密吸取供试液 0.1 mL 至 10 mL 容量瓶中，加入蒸馏水补足至 1.0 mL，苯酚-硫酸法显色，487 nm 测定吸光度，计算药材中多糖的含量，结果见表 2。

　　2.4 马齿苋总黄酮的含量测定[9]

　　2.4.1 芦丁标准溶液的制备

　　精密称取芦丁标准品加 75%乙醇(v/v)溶液溶解，配制成浓度为 0.205 4 mg·mL-1的标准溶液。

　　2.4.2 供试品溶液制备

　　精密称取适量脱脂样品，置于具塞锥形瓶中，按料液比 1∶25，精密 75%乙醇(v/v)25 mL，静置 10 h，于 40 ℃超声提取 80 min，过滤，取续滤液作为供试品溶液。

　　2.4.3 样品含量测定

　　精密吸取供试液 1.0 mL 至 10 mL 容量瓶中，加入 75%乙醇补足至 5.0 mL，亚硝酸钠-硝酸铝法显色，506 nm 处测定吸光度，计算药材中总黄酮的含量，结果见表 2。

　　3 结论与讨论

　　3.1 结论

　　不同产地的马齿苋药材浸出物含量不同，水浸出物和醇浸出物含量顺序也不相同。水溶性浸出物变化幅度在 19.7%~35.7%(g/g)之间，由高到低依次为西安、北京、贵州、四川。醇溶性浸出物变化在 10.8%~17.0%(g/g)之间，由高到低依次为西安、贵州、四川、北京。马齿苋中水溶性浸出物含量总体高于醇溶性浸出物，产于西安的马齿苋药材水溶性、醇溶性浸出物含量均高于其它产地。

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　　不同产地的马齿苋药材中多糖、总黄酮含量存在较大差异，其多糖含量变化幅度为 3.54%~9.98%，由高到低依次为西安、四川、贵州、北京。总黄酮含量变化幅度为 0.77%~0.97%，由高到低依次为四川、贵州、西安、北京。两种成分含量变化与产地无必然联系。马齿苋药材因产地不同，其多糖和总黄酮含量存在较大差异，产地对马齿苋中活性成分的含量有较大影响。

　　3.2 讨论

　　3.2.1 活性成分、浸出物含量与马齿苋药材质量的关系

　　马齿苋含多种化学成分，国内外学者已从马齿苋中提出许多化学成分，主要包括：多糖类、黄酮类、生物碱类、有机酸类、萜类、挥发油类等，此外还含有多种蛋白质、矿物质、维生素、果胶等。多糖、黄酮等成分药理作用明确。水浸出物中主要含多糖、蛋白质、维生素、黄酮类、苷等水溶性成分，醇溶性浸出物中含游离黄酮、甾体、生物碱等成分含量较高。浸出物、活性成分的含量高低能反映马齿苋质量的优劣。因此若以多糖含量做标准，西安和贵州的马齿苋质量较好，北京的质量最劣;若以总黄酮含量为标准，四川的马齿苋质量最好，含量为 0.97%;若以水浸出物含量为标准，西安和北京的马齿苋质量较好;若以醇浸出物含量为标准，西安和贵州的马齿苋质量较好。但浸出物含量与活性成分含量并不十分吻合，西安的马齿苋无论醇浸出物还是水浸出物的含量均为最高，但其总黄酮含量在四产地中仅排第三，含量只有 0.78%;水浸出物含量较高的北京产地的马齿苋多糖含量却最低，只有 3.54%。因此，评价马齿苋质量不能仅以浸出物含量或个别活性成分含量为依据，应综合评价。

　　3.2.2 浸出物的测定

　　浸出物的测定是中药材品质评价方法之一，测定药物的总固体量，一般用于该药材的活性成分或指标性成分不清或含量很低或尚无精确的定量方法时采用。马齿苋化学成分复杂多样，药理作用广泛，单个成分的含量不能全面反应药材的质量。2015 版《中国药典》中未对马齿苋药材中有效成分有相关规定，本实验通过对马齿苋药材浸出物含量进行测定，初步对其有效成分进行研究。实验结果表明，不同产地的马齿苋药材浸出物含量差异较大，西安产的马齿苋药材水溶性浸出物含量最高，四川最低，之间含量相差近二倍。醇溶性浸出物含量结果为西安最高，北京最低。水溶性浸出物含量和醇溶性浸出物含量没有必然联系。

　　因此，为了规范市场中马齿苋药材的质量，建议药典中对马齿苋药材浸出物的测定制定相关标准。

　　3.2.3 提取方法的确定

　　目前对马齿苋中多糖和黄酮化合物提取方法研究主要集中在有机溶剂提取法、超声波法、微波法、酶解法和大孔树脂法等。其中溶剂提取法中溶剂消耗大、提取时间长，而且操作复杂;采用酶解法时酶的使用会增加提取成本;超声波提取可极大地提高提取效率，节约溶剂，避免高温对提取成分的影响，与常规提取法相比，具提取时间短、产率高、无需加热等优点[10]。因此，本实验选用超声波提取法提取马齿苋多糖和黄酮成分。此外，在试验过程中对比了直接超声提取和浸润后超声提取两种方法对马齿苋中多糖提取率的影响。结果表明，先浸润后超声提取方法的多糖提取率明显高于直接超声提取。并对浸润时间做了相应考察，结果表明，经浸润 10 h 后超声提取马齿苋多糖提取率较高，因此，实验中采用浸润 10 h 后超声提取的方法对马超中多糖和黄酮化合物进行提取。

　　3.2.4 马齿苋中多糖、总黄酮含量测定结果探讨

　　马齿苋为《中国药典》收载的药材，笔者按照药典的方法对北京、四川、贵州、西安四产地的马齿苋药材进行了性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别、水分检查。结果显示，四产地马齿苋质量均符合药典规定。但本文实验结果显示，马齿苋中多糖、总黄酮含量存在较大差异，多糖含量为 3.54%~9.98%，总黄酮含量为 0.77%~0.97%。同时，也有文献报道其他地区马齿苋多糖、黄酮含量差异很大[11,12]，这可能是因为不同产地的气候条件、土壤条件、地形条件和生物条件等影响因素不同，使其药材质量参差不齐。此外，马齿苋中有效成分复杂多样，《中国药典》中对马齿苋的成分及其含量无相关规定，建议对马齿苋中活性成分进行进一步研究，并重新修订马齿苋质量标准，增加对多糖、总黄酮等活性成分的规定。